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二氧化鋯包覆的二氧化硅核殼型填料制備及選擇吸附磷脂

發布時間 | 2017-11-10 點擊量 | 108

磷脂( Phospholipids,PLs)是含有磷酸的脂類,它為兩性分子,一端為親水的含磷酸基團的極性頭基,另一端為疏水的含有兩條長脂肪酸鏈的非極性尾部。磷脂是生物體內細胞膜的重要組成部分,在細胞信號傳導和細胞凋亡方面發揮著重要作用,它也與許多疾病的發生有關,可作為某些疾病的信號分子。磷脂分為兩大類:甘油磷酯類和鞘脂類,甘油磷脂又分為卵磷脂、腦磷脂、磷脂酰絲氨酸和磷脂酰肌醇等,所以磷脂的種類繁多。

 基于磷脂結構的復雜性和多樣性,磷脂分析是一個挑戰。常用的有薄層色譜法( TLC)、核磁共振( NMR)、質譜(MS)、氣相色譜.質譜聯用(GC-MS)和液相色譜.質譜聯用(LC-MS)等技術。TLC法靈敏度和分辯率都較低,且易引起磷脂的氧化和分解;CC-MS不適合于直接分析磷脂,因為磷脂沒有揮發性,需要經水解、甲酯化等處理;3lp_NMR可利用磷原子3lp來分析各種磷脂,但NMR法的靈敏度較低,僅限于磷脂酰膽堿等組織中含量較高的磷脂樣品的測定;MS法,特別是電噴霧質譜(ESI-MS)是目前磷脂分析中應用最多的軟電離法,ESI-MS法前處理簡單,分析時間短,不足之處在于難以分析豐度較低的磷脂。在此基礎上,Han等又開發了基于源內分離的“鳥槍法”和多維質譜法測定磷脂和其他脂質分子。HPLC-ESI-MS具有高分辨率、高靈敏度和特異性強等優點,是磷脂分析的較好工具,但儀器價格昂貴。蒸發光散射檢測器(Evaporative light scattering detector,ELSD)作為一種新型通用型檢測器,它價格便宜,且無TLC和GC-MS分析磷脂的缺點,在分析過程中不易引起磷脂的氧化和分解,適合直接分析磷脂,在磷脂分析中具有很好的可行性。

   在生物樣品中磷脂種類繁多,結構復雜,低豐度檢測困難,且干擾較多。如果在應用上述方法分析前,先對磷脂進行選擇性提取,對于體內的磷脂分析,特別是對發現一些微量的信號分子是很重要的。常用的磷脂提取方法有甲基叔丁基醚( Methyl tert-butyl ether,MTBE)液.液萃取法和固相萃取法(SPE)。SPE比較常用的是氨丙基、氨基或二醇基修飾的硅膠等正相材料,但這些方法選擇性普遍不高。

   金屬氧化物(如Zr02等)由于具有路易斯酸一堿的特性,在酸性條件下可以與帶有磷酸基團的物質結合,達到與其它物質分離的目的,在堿性條件下洗脫則可達到富集的目的,故金屬氧化物選擇性富集磷脂是非常有前景的方法,但Zr02本身存在比表面積小,顆粒粒徑小,不適合做SPE填料等缺點。本研究采用NH3/H2O內部水解法,將Zr02負載在球形硅膠微球之上,制成核殼型Zr02/Si02顆粒,并填充為SPE小柱,用于選擇性富集磷脂,并采用RPLC-ELSD進行評價。結果表明,本研究獲得的核殼型Zr02/Si02顆粒具有良好的富集效率,在生物樣品分析中有很好的應用前景。


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